當實驗真正開始時，很多實驗人員都會遇到一個幾乎無法避免的問題——

細胞污染。

輕則影響細胞狀態(tài)和實驗數(shù)據(jù)，

重則導致整批細胞報廢，實驗周期被迫重新開始。

那么，細胞培養(yǎng)中的污染究竟從哪里來？又該如何識別和避免？

01

為什么細胞培養(yǎng)特別容易污染？

細胞培養(yǎng)（Cell Culture），是指在體外人工控制的條件下，為細胞提供適宜的生存環(huán)境，使其能夠存活、增殖，并盡可能保持其原有的生物學特性。

簡單理解，就是：細胞培養(yǎng)體系本質(zhì)上是一個非常適合微生物生長的環(huán)境。培養(yǎng)基中富含：

葡萄糖

氨基酸

維生素

血清蛋白

同時培養(yǎng)箱還提供：

37℃恒溫

穩(wěn)定濕度

適宜氣體環(huán)境

這些條件不僅適合細胞生長，同樣也非常適合細菌、真菌等微生物快速繁殖。一旦污染發(fā)生，污染微生物會：與細胞競爭營養(yǎng)、改變培養(yǎng)液 pH、釋放代謝產(chǎn)物影響細胞狀態(tài)最終導致細胞死亡或?qū)嶒灲Y(jié)果失真

因此，在細胞培養(yǎng)中，無菌操作始終是最核心的基本原則之一。

02

細胞培養(yǎng)中常見的 4 種污染

1 細菌污染（常見）

細菌污染通常發(fā)展非常迅速，是實驗室中常見的污染類型。

常見表現(xiàn)：

培養(yǎng)液快速變渾濁

培養(yǎng)基顏色變黃

顯微下可見大量微小顆?？焖龠\動

常見來源：

操作過程中無菌控制不嚴格

槍頭、移液管或培養(yǎng)瓶口接觸污染

培養(yǎng)基或血清污染

一旦發(fā)生細菌污染，通常不建議繼續(xù)培養(yǎng)，應及時廢棄污染細胞并清潔培養(yǎng)設備。

2 真菌污染

真菌污染雖然發(fā)生頻率低于細菌，但擴散速度同樣很快。

常見表現(xiàn)：

培養(yǎng)液中出現(xiàn)絮狀或棉絮狀漂浮物

顯微鏡下可見絲狀或分枝結(jié)構(gòu)

細胞貼壁狀態(tài)明顯變差

真菌孢子廣泛存在于空氣中，因此在操作過程中暴露時間過長或操作環(huán)境不潔凈，都可能增加污染風險。

3 支原體污染（最隱蔽）

支原體污染是細胞培養(yǎng)中最隱蔽、也最容易被忽視的問題之一。

與細菌或真菌不同，支原體污染通常不會導致培養(yǎng)液渾濁，因此肉眼很難發(fā)現(xiàn)。

可能出現(xiàn)的情況包括：

細胞生長速度明顯變慢

細胞形態(tài)發(fā)生變化

實驗數(shù)據(jù)重復性下降

因此，實驗室通常需要定期進行支原體檢測，確保細胞體系的可靠性。

4 細胞交叉污染

除了微生物污染外，細胞系之間的交叉污染也是實驗室中需要警惕的問題。

例如：

不同細胞同時操作

標識管理不規(guī)范

移液器或槍頭使用不當

都可能導致細胞系混雜，最終影響實驗結(jié)果。

03

如何降低細胞培養(yǎng)污染風險？

在細胞培養(yǎng)中，與其事后補救，不如從源頭控制風險。

常見的預防措施包括：

規(guī)范作流程

在生物安全柜中完成操作

減少培養(yǎng)容器暴露時間

定期清潔培養(yǎng)箱和實驗環(huán)境

建立良好的細胞管理習慣

定期進行支原體檢測

合理進行細胞凍存與復蘇

避免不同細胞系同時操作

選擇穩(wěn)定可靠的培養(yǎng)耗材

細胞培養(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、移液管及離心管等耗材，本身也是細胞培養(yǎng)體系的重要組成部分。

04

耐思細胞培養(yǎng)類耗材

在細胞培養(yǎng)過程中，穩(wěn)定的實驗耗材可以有效降低人為操作帶來的不確定性。

細胞培養(yǎng)瓶 / 培養(yǎng)板

高透明度，便于觀察細胞形態(tài)與貼壁狀態(tài)

穩(wěn)定的表面性能，支持貼壁細胞培養(yǎng)需求

針對貼壁細胞培養(yǎng)需求，耐思細胞培養(yǎng)類耗材提供 TC 處理與未 TC 處理 兩種規(guī)格，可根據(jù)具體實驗場景靈活選購。

TC（Tissue Culture）表面處理通過對高品質(zhì)聚苯乙烯（PS）基材表面進行受控改性，在不添加生物涂層的前提下提升表面親水性并引入穩(wěn)定極性官能團，從而增強細胞附著能力，促進貼壁細胞快速鋪展與穩(wěn)定生長。

離心管 / 凍存管

良好密封性，降低細胞轉(zhuǎn)移與儲存過程中的風險

適用于細胞收集、凍存及復蘇等基礎(chǔ)操作

血清移液管 / 吸頭

內(nèi)壁光滑，液體殘留少

疏水性、超低吸附性

幫助降低人為操作帶來的不確定因素

在細胞培養(yǎng)實驗中，

產(chǎn)品細胞培養(yǎng)類耗材均保證：

無菌

無熱源/內(nèi)毒素

無細胞毒性、

無 DNA、無 DNase/RNase

污染并不是偶然事件，而是常見的實驗挑戰(zhàn)之一。

理解污染來源、建立規(guī)范操作習慣，并配合穩(wěn)定可靠的實驗耗材，

是保持細胞培養(yǎng)體系長期穩(wěn)定的關(guān)鍵。